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產(chǎn)品分類/PRODUCT CLASS

產(chǎn)品簡介

LE,人白細胞酯酶ELISA試劑盒原理

價格：電議

采購度：155 原產(chǎn)地：美洲

發(fā)布時間：2018/8/9 15:24:20

LE,人白細胞酯酶ELISA試劑盒原理用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人白細胞酯酶（LE）的含量。

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標簽：LE 人白細胞酯酶 ELISA試劑盒原理

詳細信息

產(chǎn)品簡介
一、“LE,人白細胞酯酶elisa試劑盒原理”詳細參數(shù)
【檢測方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產(chǎn)品性狀】：96T
【貯藏條件】：2-8°C
【產(chǎn)品有效期】：二年，我公司Elisa試劑盒均為*新批次，可放心購買。
【產(chǎn)品主要成分】：酶標板,試劑,標準品等。
【種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
【產(chǎn)品單價】（具體折扣來電咨詢），可免費代測，含稅含運費。
【標本】血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
注：標本必須為液體，不含沉淀。
性能特點
二、“LE,人白細胞酯酶ELISA試劑盒原理”的四大特性
1．特異性強：不與其它細胞因子反應(yīng)。
2．重復(fù)性好：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
3．穩(wěn)定性高：實驗效果很穩(wěn)定。
4．超靈敏度：*小的檢測濃度小于1號標準品，稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
操作流程
三、“LE,人白細胞酯酶ELISA試劑盒原理”具體操作方法
以雙抗體夾心法為例展示：
1、雙抗體夾心法檢測抗原
操作步驟如下：
1）將特異性抗體與固相載體結(jié)合，形成固相抗體。洗滌除去尚未結(jié)
合的抗體及一些雜質(zhì)。
2）加入待測標本，保溫反應(yīng)。標本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3）加酶標抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關(guān)。
4）加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色，測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中，此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標所使用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應(yīng)用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應(yīng)，作一步檢測。
在一步法測定中，當標本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結(jié)合，而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象，此時反應(yīng)后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標準曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測讀，所得結(jié)果將低于實際的含量，這種現(xiàn)象被為鉤狀效應(yīng)（hook effect），因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴重時，反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質(zhì)（例如血清中 HBsAg、AFP 和尿液 hCG 等）時，應(yīng)注意可測范圍的值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。
四、客戶收集樣品要求
·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原。
·檢測的樣本為細胞培養(yǎng)上清、人和動物的血清、血漿。
·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存，若長期保存應(yīng)-70℃。
·樣本量的要求：若一個指標做復(fù)孔檢測應(yīng)不少于250ul，做單孔檢測應(yīng)不少于120ul。建議若客戶樣本量充足提供500ul以上。
·客戶的樣本收集后，立即按要求保存，切忌反復(fù)凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運輸。郵寄前請與技術(shù)支持溝通確認。
五、Elisa試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品（480ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
六、Elisa試劑盒標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
七、操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
240ng/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
120ng/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
60ng/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
30ng/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
15ng/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品*終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。
訂購說明
八、“LE,人白細胞酯酶ELISA試劑盒原理”咨詢和訂購的方法
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更新時間：2024/12/19 14:30:02

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