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上海恒遠(yuǎn)公司支原體的特點及檢測方法

閱讀次數(shù):1197   發(fā)布時間:2014/4/22 9:17:21

支原體是一種大小介于細(xì)菌和病毒之間(*小直徑0.2um)并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體無細(xì)胞壁形態(tài)呈高度多形性?蔀閳A形、絲狀或梨形。

支原體形態(tài)多變,在光境下不易看清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。電鏡下觀察支原體膜為三層結(jié)構(gòu)。其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細(xì)胞表面和細(xì)胞之間。橫斷面與細(xì)胞微絨毛相似,但微絨毛電子密度比支原體小,且中央無顆粒群或中央束。

支原體代謝需固醇類物質(zhì)、部分種類需要精氨酸、O 2或葡萄糖,每一種支原體都有自身持點。多數(shù)支原體適合于偏堿條件下生存(PH7.6—8.0),對酸耐受性差。對熱比較敏感,對一般抗生素不敏感。

支原體污染細(xì)胞后。培養(yǎng)液可不發(fā)生混濁。多數(shù)情況下細(xì)胞病理變化輕微或不顯著,細(xì)微變化也可由于傳代、換液而緩解。因此易被忽視。但個別嚴(yán)重者,可致細(xì)胞增殖緩慢。甚至從培養(yǎng)器皿脫落。

 

支原體檢測方法:

1、相差顯微鏡檢測;2、低張?zhí)幚淼匾录t染色觀察; 3、DNA熒光染色法;4、電鏡檢測;5、3-H胸腺嘧啶摻入法; 6、聚合酶鏈反映法; 7、免疫學(xué)方法; 8 、支原體的培養(yǎng)。

對于支原體污染的細(xì)胞,可以采取補救措施:

1、抗生素排除法:可以用5-10倍于常用量的沖擊法,加入高濃度抗生素后作用24-48小時,再換入常規(guī)培養(yǎng)液,有時可能有效。推薦用量:慶大霉素 200ug/ml ,四環(huán)素10ug/ml ,卡那霉素50ug/ml 。對于支原體污染抗生素應(yīng)用,預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好。

2、 加溫除菌:根據(jù)支原體耐熱性能差的特點。將受支原體污染的細(xì)胞置于41度中作用5-10小時可以殺滅支原體。但由于41度對培養(yǎng)細(xì)胞本身也有較大的影響,故處理前,應(yīng)行預(yù)試驗,確定出限度殺傷支原體而對細(xì)胞影響較小的處理時間。

 

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