昆蟲有一個開放的循環(huán)系統(tǒng)，血液可以簡單地通過一個切口在身體墻。*方便的，你應(yīng)把一條腿讓血滴到冷的玻璃燒杯。以獲得的收益，這是必要的，排除血液注入緩沖進(jìn)入體腔。實(shí)驗(yàn)過程是如下圖所示。

搬遷后的血細(xì)胞，溴化鉀添加到血形成44%個解決方案。這是分層與磷酸鹽緩沖液（公共廣播公司），并形成一個密度梯度離心。*終，所有的蛋白質(zhì)上浮或下沉的區(qū)域對應(yīng)的密度。有一個低密度脂蛋白，黃色漂浮高于non-lipoproteins，包括綠色cyanoprotein。分離蛋白是分離。對個人的分?jǐn)?shù)，密度是由折射率，蛋白質(zhì)含量和組成的Brad ford法和電泳，分別，和脂質(zhì)成分可以分析薄層和氣相色譜法。

實(shí)驗(yàn)議定書

•1天出血和離心。

•2天分餾，折射率和透析。

•3天凍干。

1天：出血和離心。

注意：你需要戴上手套，整個程序。

每一組需要10 - 15蝗蟲。

1。以2 - 5毫升的公共電視網(wǎng)在一個干凈的100毫升燒杯和添加25µ升200毫米磺酰氟

注意安全。劇毒的！

2。流血的蝗蟲持有所有的腿和翅膀斷一條腿靠近胸部（見圖片）。確保沒有昆蟲的唾液淌進(jìn)燒杯（已經(jīng)準(zhǔn)備好紙巾擦口水）。

3。輕輕注入幾百微升了通過部分皮下。

不要傷害腸道！。

4。沖洗血（黃因胡蘿卜素）仔細(xì)進(jìn)行擠壓胸腔部位輕輕。收集血液從10 - 12蝗蟲。

5。把流血蝗蟲在罐子里。當(dāng)他完成了出血，movet罐子的電冰箱。處理過的動物尸體在稍后的日期。

6。使血解決~ 15毫升與公共電視網(wǎng)。

7。添加8.9克溴化鉀晶體，輕輕地攪拌，用干凈的攪拌棒。

8。溶解部分轉(zhuǎn)移到50毫升量筒和添加更多（2 - 3毫升）公共廣播溶解溴化鉀和攪拌至溶解。游泳池這些解決方案，高達(dá)20毫升的攪拌進(jìn)一步在測量筒。

9。轉(zhuǎn)移到30毫升塑料注射器（由夾子）連接到18針針和毛細(xì)管（見圖片）。

10。讓血流進(jìn)熱密封的離心管。

11。另加20毫升的注射器進(jìn)入覆蓋的血。

12。又熱封口溫暖起來。

13。平衡樣本來自其他組；你必須精確！用分析天平、添加或刪除公共電視網(wǎng)或從管。如果液體是在脖子上，去除尖端組織。

14。將金屬帽的管，和密封的熱封口機(jī)。一旦上限達(dá)到管的肩膀，快速移動的權(quán)利和推管蓋與散熱片。

15。將四管積分50轉(zhuǎn)子的相對位置和地點(diǎn)，在超速離心機(jī)轉(zhuǎn)子。

16。確保蓋關(guān)閉。打開真空離心機(jī)。設(shè)置運(yùn)行的條件10℃，剎車，45000，時間4.5 h。

17。旋轉(zhuǎn)45000轉(zhuǎn)為4.5小時，和留樣一夜之間在離心機(jī)的。

2天：檢索樣本

（約2 - 3小時連續(xù)）

1。運(yùn)行后結(jié)束，把真空，等到室壓力達(dá)到大氣壓力。現(xiàn)在您可以刪除管。

2。注意任何不尋常的觀察期間或之后，法離心（例如，泄漏），并記錄在離心機(jī)的書。清潔室和轉(zhuǎn)子，并開始排練避免凝結(jié)在離心機(jī)。

3。用一把鋒利的單刃剃刀仔細(xì)剪開離心管。

4。建立biorad餾分收集器。內(nèi)容為20毫升的組分分餾。

5。確定密度使用折射計。

6。同時測定紫外吸光度在280納米。記得使用uv-permeable塑料試管（1對）。

7。而確定的折射率發(fā)生2件透析管（每個約20厘米長）到500毫升的燒杯中充滿了區(qū)水。

8。離開一個整除（300µ升）每一部分標(biāo)記修改離心管透析。

9。透析對~ 1升區(qū)水在寒冷的房間，改變緩沖區(qū)的一次。

10。小心將整體攜脂組分（通常是3 - 5黃色分?jǐn)?shù)）進(jìn)入透析管（關(guān)閉了在底部有一個橙色鉗）使用巴斯德吸管。

11。關(guān)閉透析管，確保留下足夠的擴(kuò)展空間，在透析。

12。透析對4升區(qū)水在寒冷房間里過夜。改變水和重復(fù)撥號