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恒遠(yuǎn)生物|試劑盒的實(shí)驗(yàn)異常及對(duì)策分析

點(diǎn)擊次數(shù):14400   發(fā)布時(shí)間:2022/5/11 9:34:52

     很多客戶在購(gòu)買試劑盒的時(shí)候都會(huì)咨詢多少錢?質(zhì)量怎么樣之類的問(wèn)題。不同的細(xì)胞因子的試劑盒或其他試劑盒價(jià)格不一樣,不同種類的試劑盒價(jià)格也不同。上海恒遠(yuǎn)大鼠elisa試劑盒,小鼠elisa試劑盒可以提高免費(fèi)代測(cè)服務(wù),也可以為您提供技術(shù)指導(dǎo)。價(jià)格合理,實(shí)驗(yàn)效果安全可靠。
試劑盒的實(shí)驗(yàn)異常及對(duì)策分析
·異常:白板
·結(jié)果描述:顯色步驟結(jié)束后酶標(biāo)板所有孔均無(wú)顏色。陽(yáng)性對(duì)照不顯色。
·原因分析:試劑已過(guò)有效期,或不同試劑盒組分混用,檢查試劑的組分及批號(hào),確認(rèn)未過(guò)期以及所有組分均屬對(duì)應(yīng)的試劑盒。
·對(duì)策:不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑不能混用。
    整板的黃板現(xiàn)象可能是由于錯(cuò)加其他試劑造成,如同時(shí)操作兩對(duì)半試劑時(shí),測(cè)HbsAb板用于測(cè)HBsAg等;實(shí)驗(yàn)檢查試劑的組分及批號(hào),確認(rèn)所有組分均屬于對(duì)應(yīng)的試劑盒。如盛標(biāo)本的試管四周常有血痂,易脫落,應(yīng)遠(yuǎn)離酶標(biāo)板。ELISA試劑盒超過(guò)有效期的產(chǎn)品可能會(huì)產(chǎn)生很弱的信號(hào);試劑盒沒(méi)有按規(guī)定進(jìn)行留存,受高溫影響;實(shí)驗(yàn)檢查試劑的組分及批號(hào),確認(rèn)試劑未過(guò)期。
    孵育溫度應(yīng)控制在37-38℃,孵育時(shí)間嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作,保溫期內(nèi)不宜多開(kāi)門,以免影響保溫;ò,一般是由于臨床標(biāo)本的收集、處理和留存方法不當(dāng)造成,放置時(shí)間及離心轉(zhuǎn)、離心時(shí)間應(yīng)引起注意。試劑、樣品用未平衡至室溫從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應(yīng)置室溫平衡,20分鐘左右。
    錯(cuò)加、漏加試劑底物、顯色劑 A或B 嚴(yán)格按說(shuō)明書的步驟操作,加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,以減少漏加現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,陰陽(yáng)性對(duì)照正常,質(zhì)控正常,但臨床標(biāo)本感覺(jué)顯色較弱,待測(cè)標(biāo)本中可能不含強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本,故結(jié)果可能是正常的,如有懷疑,可復(fù)檢標(biāo)本加入疊氮鈉作為防腐劑,酶免實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)本禁用疊氮鈉作為防腐劑,可選用 proclin、硫柳汞等其他防腐劑,陰陽(yáng)性對(duì)照正常,但質(zhì)控、參考品或個(gè)別弱陽(yáng)性標(biāo)本未能檢出。
      
    不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑不能混用酶標(biāo)對(duì)吸頭的污染以及對(duì)盛放顯色劑容器的污染都易造成黃板現(xiàn)象;避免試劑組分間的交叉污染,確保吸頭、容器的干凈,顯色劑在光照條件下放置過(guò)久,實(shí)驗(yàn)已變藍(lán),顯色劑A、B未使用避光留存,孵育溫度過(guò)高或孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng);孵育溫度應(yīng)控制在37-38℃,孵育時(shí)間嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。標(biāo)本在一周內(nèi)使用的,可存于2-8℃,如需留存,應(yīng)置于-20℃以下留存。
    不要將ELISA試劑盒長(zhǎng)時(shí)間置于常溫下,按使用規(guī)定儲(chǔ)藏。出現(xiàn)隨機(jī)性的花板、跳孔現(xiàn)象 樣品離心,反應(yīng)孔內(nèi)發(fā)生凝血或殘留細(xì)胞成分;充分離心,3000rpm6分鐘以上。儀器設(shè)定不正確,濾光片不匹配,重新設(shè)定酶標(biāo)儀的參數(shù),特別是檢查濾光片是否匹配,靈敏度過(guò)高、板底高、高背景 終止后,整板結(jié)果顯現(xiàn)均一的黃色或淡黃色;或陰陽(yáng)性對(duì)照、質(zhì)控正常,標(biāo)本陰性標(biāo)本,OD值過(guò)高。特別是洗滌時(shí)每孔未注滿洗液,易造成花板黃板現(xiàn)象,嚴(yán)格按說(shuō)明書要求洗板。洗板及加樣過(guò)程中,酶標(biāo)受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力,確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈。加樣時(shí)交叉污染; 加標(biāo)本時(shí)盡量 避免交叉污染。
    
    關(guān)于抗凝血和得到的血清血漿體積的關(guān)系,大致上比例是1毫升全血可以得到500 ul 血清或血漿。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。需要的樣本量取決于你的檢測(cè)項(xiàng)目,有些檢測(cè)項(xiàng)目需要血清做1:100稀釋,甚至是更高的稀釋度,那么幾微升血樣就夠了,有些項(xiàng)目只能做較低的稀釋,甚至不稀釋,這樣的話每孔會(huì)需要100 ul 左右
 
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是一家生物技術(shù)企業(yè),公司秉承“注品質(zhì)、積溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積參與生物域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國(guó)科研事業(yè)添磚加瓦。上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是一家生物技術(shù)企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售,為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù),滿足生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物科技實(shí)驗(yàn)需求。
 

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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