我們知道，能夠用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本很廣泛，包含了體液、分泌物和排泄物等，均可作標(biāo)本以測(cè)定其間某種抗體或抗原成份。這些標(biāo)本搜集的時(shí)間、辦法和保存都有必定的要求。今天小編為您解說(shuō)：ELISA操作嚴(yán)格要求定當(dāng)做出好實(shí)驗(yàn)。

    按試劑盒闡明書(shū)的要求預(yù)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA頂用的蒸餾水或去離子水，包含用于洗刷的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液運(yùn)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的實(shí)驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后運(yùn)用。試劑盒中本次實(shí)驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
   
    洗板辦法：

    ① 手工洗板，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上烘托幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的洗刷緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。

    ② 自動(dòng)洗板，如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練運(yùn)用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

    試劑盒的制造：

    關(guān)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀闡明書(shū)，留意每批的細(xì)節(jié)。在運(yùn)用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地收回其間的細(xì)胞因子。根據(jù)每批闡明書(shū)中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性規(guī)劃的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、擴(kuò)展試劑盒、第三類試劑、或改動(dòng)酶底物系統(tǒng)可在必定規(guī)劃內(nèi)進(jìn)步靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度，建議孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。若運(yùn)用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物elisa試劑盒酶的活性。

    試劑盒的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所差異，國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司