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技術(shù)文章

探討:培養(yǎng)基檢測水體細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)

點(diǎn)擊次數(shù)：15050 發(fā)布時(shí)間：2018/12/19 10:13:30

近日，我公司的培養(yǎng)基新品推出后得到可客戶們的良好反應(yīng)。有客戶在售后反饋表中提出，在公司wang站中可以多分享一些相關(guān)培養(yǎng) 基的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，對此問題我們會多加注意，后期會陸續(xù)增加培養(yǎng)基技術(shù)篇幅。今天我們來看看zui新實(shí)驗(yàn)探討：培養(yǎng)基檢測水體細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)。

一、所需培養(yǎng)基
營養(yǎng)瓊脂、肉浸湯瓊脂、蛋白胨葡萄糖瓊脂、857培養(yǎng)基。

二、樣品來源
1998年1O月隨機(jī)采取本市便河居民點(diǎn)生活用自來水，便河河水及本院池塘塘水各9份。

三、操作方法
自來水采樣：先將采樣點(diǎn)自來水龍頭完全開放，放水5分鐘后調(diào)水流量，常規(guī)無菌采集水樣500ml，并加入無菌的3%硫代硫酸鈉溶液 0.5ml以除去殘余氯；河水與塘水采樣：先將密封狀態(tài)的無菌采樣瓶完全浸入水中后，掀開瓶塞，取樣約500ml。進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)檢測。每次以無菌方法分別吸取lml充分混勻的水樣于滅菌空平皿中，每份水樣各加 8個(gè)，每2個(gè)為1組，隨即分別加入15ml滅菌并置45℃預(yù)溫的營養(yǎng)瓊脂、肉浸湯瓊脂、蛋白胨葡萄糖瓊脂、857瓊脂并充分混勻，凝固后，置 37~C培養(yǎng)24h、48h、72h、96h并分別記錄各培養(yǎng)基中菌落形成單位 (CFU)均數(shù)。采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

四、結(jié)果
4種方法培養(yǎng)后CFU均數(shù)結(jié)果：24h內(nèi)4種培養(yǎng)基的CFU均數(shù)，隨培養(yǎng)時(shí)間延長而增高(見下表)。

培養(yǎng)時(shí)間(h)	營養(yǎng)瓊脂	肉浸湯瓊脂	蛋白胨葡萄糖瓊脂	857培養(yǎng)基
24	74	100	76	16
48	105	138	103	26
72	120	152	121	32
96	133	163	130	36

    不同時(shí)間培養(yǎng)后4種培養(yǎng)基的CFU均數(shù)的結(jié)果顯示：培養(yǎng)48h與72h 、72h與96h組間CFU均數(shù)差異無顯著性；培養(yǎng)24h與48h，24h與72h、 24h與96h、48h與96h各組間、CFU均數(shù)的差異有高度顯著性(P<0.01)。

    4種培養(yǎng)基的CFU均數(shù)間兩兩比較：除營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基與蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基之間CY U均數(shù)的差異無顯著性外，肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與857培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基與857培養(yǎng)基、蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基與857培養(yǎng)基、CFU均數(shù)的差異均有高度顯著性 (P<0.01)。

本實(shí)驗(yàn)采用包括營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基在內(nèi)的4種不同培養(yǎng)基進(jìn)行檢測，結(jié)果表明，不同培養(yǎng)基之間CFU均數(shù)差異顯著，且肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基> 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基>蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基>857培養(yǎng)基。值得注意的是肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的CY＇U均數(shù)差異顯著，且培養(yǎng)至 24h觀察結(jié)果時(shí)，肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基表面的菌落較大，易辨認(rèn)，而營養(yǎng) 瓊脂培養(yǎng)基上菌落較小，需培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)。這可能與前者用新鮮牛肉浸液配制，而后者用牛肉膏配制有關(guān)。因肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)高于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，更有利于水體樣本中細(xì)菌總數(shù)的檢測。

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