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快樂暑假:看技術(shù)專家解析ELISA試劑盒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

點(diǎn)擊次數(shù):14982   發(fā)布時(shí)間:2018/7/11 9:54:27

    我眼中的暑假是快樂的、是歡愉的、是漫長(zhǎng)的、是豐富的、是有趣的......近日,我公司實(shí)驗(yàn)部技術(shù)專家聯(lián)系錢經(jīng)理溝通zui新ELISA技術(shù)。據(jù)錢經(jīng)理了解,現(xiàn)目前為止各大學(xué)校都已經(jīng)開始暑假,上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)員整理出這學(xué)期以來客戶們所常見的操作問題總結(jié)。下面是技術(shù)專家解析elisa試劑盒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

1.所謂的單波長(zhǎng)比色等于通常的以對(duì)顯色具有吸收的波長(zhǎng)如450nm或492nm進(jìn)行比色測(cè)定;
2.而雙波長(zhǎng)雙色則酶標(biāo)儀在敏感波長(zhǎng)如450nm和非敏感波長(zhǎng)630nm下各測(cè)定一次,敏感波上下的吸光度測(cè)定值為樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和;
3.非敏感波長(zhǎng)下測(cè)定即改變波長(zhǎng)至一定值,ELISA試劑盒使得樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度值為零,此時(shí)測(cè)得的吸光度即為臟物的吸光度值。
       
    以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長(zhǎng)為450nm,后者為492nm,濾光片需根據(jù)要求隨時(shí)更換。*后酶標(biāo)儀給出的數(shù)值為敏感波長(zhǎng)下的吸光度值與非常感波長(zhǎng)下的吸光度值的差。以軟板為載體的試驗(yàn),需先將板置于尺度96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。ELISA試劑盒比色時(shí)應(yīng)先以蒸餾水校零點(diǎn),測(cè)讀底物孔。

    因?yàn)镋LISA試劑盒測(cè)定中單個(gè)空缺孔的非特異吸收上有一定程度的不確定性,也就是說每次測(cè)定或同次測(cè)定空缺孔位置的不同均有可能得到不同吸光度測(cè)定值,所以在ELISA測(cè)定比色時(shí),是使用雙波長(zhǎng)比色。因此,雙波長(zhǎng)比色測(cè)定具有能排除由微滴板本身、板孔內(nèi)標(biāo)本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對(duì)特異顯色測(cè)定吸光度的影響的長(zhǎng)處。
         
    另外,上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司特別提醒大家,在操作過程中,在ELISA實(shí)驗(yàn)測(cè)定中,還要注意:稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗(yàn)的均一性。了解更多相關(guān)ELISA技術(shù),歡迎您登陸我公司網(wǎng)站查詢,*新產(chǎn)品目錄、操作技術(shù)搶先看!

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