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技術(shù)文章

上海恒遠(yuǎn)教您怎樣繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

點(diǎn)擊次數(shù)：14833 發(fā)布時(shí)間：2016/7/13 10:28:35

每次ELISA試驗(yàn)都需要去做標(biāo)準(zhǔn)曲線，許多剛接觸實(shí)驗(yàn)的同學(xué)在做完ELISA實(shí)驗(yàn)后分析數(shù)據(jù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖更是無從下手。上海恒遠(yuǎn)技術(shù)人員為大家詳細(xì)解釋下怎樣繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線圖：
1.擬和曲線：
輸入行：濃度值，如0 10 50 100 400輸入第二行：該濃度下的調(diào)整后的od值，如0 0.586 1.397 1.997 3.42選擇這些輸入的數(shù)據(jù)，用插入里的圖表按鈕，進(jìn)入圖表向?qū)В?ldquo;標(biāo)準(zhǔn)類型"中選擇“xy散點(diǎn)圖"；在“子圖表類型"中選擇“折線散點(diǎn)圖"，按“下一步"；選擇“系列產(chǎn)生在行"，按“下一步"；數(shù)據(jù)標(biāo)志，可以填寫：如數(shù)據(jù)y軸，OD值；數(shù)據(jù)x軸，濃度；
按下一步，點(diǎn)擊完成。可得曲線圖。
單擊曲線，按右鍵，選擇“添加趨勢線"，在類型中，選擇多項(xiàng)式；在選項(xiàng)中，選擇顯示公式，選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。也可以用上面說的方法：雙擊圖表，把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中，就可以擬和曲線。
2.計(jì)算濃度：
標(biāo)準(zhǔn)曲線為：
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例，已知OD值，計(jì)算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x，所以可以得到：
4E-05x2 －0.026x ＋y＝0
ax2 ＋bx ＋y＝0
a＝4E-05；b＝－0.026；
x＝（－b－（b*b－4ay）（平方根）） /（2*a）
代入a，b，和y值，得
x＝（0.026－（0.026*0.026-0.00016*y）（平方根））/（2*0.00004）
在excel里可以用以下公式表示：
x＝（0.026-EXP（LN（0.026*0.026-0.00016*y）/2））/（2*0.00004）
通用公式為：x＝（－b－EXP（LN（b*b－4ay）/2））/（2*a）

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司