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河南大學(xué)張老師分析豚鼠α防御素（α-DF）ELISA試劑盒實驗原理及注意事項

點擊次數(shù)：14945 發(fā)布時間：2015/12/31 8:46:24

昨日，河南大學(xué)張老師來電咨詢了我司豚鼠α防御素（α-DF）elisa試劑盒，在咨詢的過程中她有問到我司豚鼠α防御素（α-DF）ELISA試劑盒的使用目的及實驗原理，說想對豚鼠α防御素（α-DF）ELISA試劑盒進(jìn)行分析，分析一下是檢測含量的還是檢測什么的，實驗過程中應(yīng)注意哪些事項，下面是我司錢經(jīng)理為張老師提供的一些資料（僅供參考）

豚鼠α防御素（α-DF）ELISA試劑盒目的:本試劑盒用于測定豚鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中α防御素（α-DF）的含量。

豚鼠α防御素（α-DF）ELISA試劑盒實驗原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豚鼠α防御素（α-DF）水平。用純化的豚鼠α防御素（α-DF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入α防御素（α-DF），再與 HRP 標(biāo)記的α防御素（α-DF）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。 TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α防御素（α-DF）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度（ OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中豚鼠α防御素（α-DF）濃度。

豚鼠α防御素（α-DF）ELISA試劑盒注意事項：

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存；

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果；

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣；

4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（ n 倍）后再測定，計算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）；

5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染；

6.底物請避光保存；

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)；

8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理；

9.本試劑不同批號組分不得混用。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司